(ZYMV) es una grave amenaza para los cultivos de cucurbitáceas en todo el mundo, incluido Pakistán. Este estudio se llevó a cabo para evaluar la prevalencia, distribución geográfica y diversidad molecular de los aislados de ZYMV que infectan cucurbitáceas en la región de Pothwar en Pakistán. Casi todos los virus de plantas actúan como un estrés biótico en las plantas hospedadoras, lo que resulta en una pérdida de rendimiento. Estos virus causan pérdidas en cultivos de cucurbitáceas con infección simple o mixta, y hemos encontrado varios muestras con infecciones mixtas pertenecientes a la familia. La detección serológica de los potyvirus analizados en las muestras de cucurbitáceas recolectadas reveló que ZYMV era el virus más prevalente, con una incidencia de enfermedad (IE) del 35.2%, seguido por (PRSV) con una incidencia del 2.2%, y (WMV) con una incidencia tan baja como el 0.5% en 2016. En el año 2017, se registró una incidencia de enfermedad relativamente más alta del 39.7%, 2.4% y 0.3% para ZYMV, WMV y PRSV, respectivamente. ZYMV fue el virus más prevalente con la mayor incidencia en Attock, Rawalpindi e Islamabad, mientras que PRSV se observó como el más alto en Islamabad y Jhelum. La infección por WMV se observó solo en Rawalpindi y Chakwal. Los aislados de ZYMV recién detectados en Pakistán compartieron identidades nucleotídicas del 95.8-97.0% entre sí y del 77.1-97.8% con otros aislados recuperados de GenBank. Las relaciones filogenéticas obtenidas utilizando diferentes aislados de ZYMV recuperados de GenBank y validadas por análisis de restricción in silico revelaron que cuatro aislados pakistaníes se agruparon con otros aislados de ZYMV en el grupo IIb con aislados chinos, italianos, polacos y franceses, mientras que otro aislado (MK848239) formó un clado menor separado dentro de IIb. El aislado MK8482490, reportado por infectar calabaza amarga en Pakistán, compartió un clado menor con un aislado chino (KX884570). El análisis de recombinación reveló que el aislado de ZYMV encontrado recientemente (MK848239) es muy probablemente un recombinante de los aislados pakistaníes (MK848237) e italianos (MK956829), con un punto de ruptura recombinante entre las posiciones nucleotídicas 266 y 814. La comparación de aislados locales y la detección de recombinación pueden ayudar en el desarrollo de un programa de mejoramiento que identifique fuentes resistentes contra aislados recombinantes, ya que el ZYMV es prevalente en algunas especies de cucurbitáceas cultivadas en las áreas encuestadas y causa grandes pérdidas y daños económicos a la comunidad agrícola.