Los altos niveles de ácidos grasos no esterificados (AGNE) durante el período de transición conducen a un aumento del estrés oxidativo y la inmunosupresión en las vacas. Alimentarlas con una dieta suplementada con vitamina E reduce los niveles de especies reactivas de oxígeno (ERO) en la sangre y disminuye la inmunosupresión en el período de transición. Sin embargo, si la restauración de la función de las células inmunitarias ocurre a través de la acción directa de la vitamina E en las células sigue siendo un tema que requiere más discusión. Por lo tanto, en este experimento, nuestro objetivo fue investigar el efecto de los AGNE en los leucocitos de sangre periférica (LSP) y si la vitamina E mitiga el impacto de los AGNE. Empleamos tres grupos: (1) control, (2) solo AGNE, y (3) pre-cultivo con vitamina E antes del tratamiento con AGNE (VENEFA). En las células mononucleares de sangre periférica (CMSP), no hubo diferencias en el contenido de vitamina E entre los tres grupos. Sin embargo, en el grupo de pretratamiento con vitamina E, los niveles de vitamina E de los neutrófilos polimorfonucleares (NPM) fueron significativamente más altos que en los otros dos grupos. Los niveles de AGNE aumentaron los niveles de malondialdehído (MDA) en las CMSP, pero el pretratamiento con vitamina E redujo la acumulación de niveles de MDA. En cuanto a la expresión de genes proinflamatorios, los AGNE aumentaron la expresión de interleucina-1beta en las CMSP y del factor estimulante de colonias 2 en los NPM. El pretratamiento con vitamina E restauró el aumento en los niveles de interleucina-1beta causado por los AGNE en las CMSP. Ninguno de los grupos afectó la fagocitosis de los NPM. Pocos estudios han confirmado que los AGNE causan estrés oxidativo en los LSP bovinos. En resumen, este estudio encontró que los AGNE inducen estrés oxidativo en los LSP y alteran la expresión de genes relacionados con la inflamación; mientras tanto, la vitamina E puede reducir algunos de los efectos causados por los AGNE. Este resultado puede sugerir que la vitamina E puede ayudar a los LSP bovinos a resistir la inmunosupresión causada por un balance energético negativo (BEN) durante el período de transición.