La lepra es una enfermedad infecciosa asociada a la pobreza en humanos, causada por Mycobacterium leprae o Mycobacterium lepromatosis, que a menudo resulta en daño en la piel y en los nervios periféricos, y que sigue siendo una preocupación significativa de salud pública en áreas aisladas de países de ingresos bajos y medios. Estudios previos informaron sobre la lepra en ardillas rojas en las Islas Británicas, a pesar de que los casos humanos autóctonos han estado ausentes en esta región durante siglos. Para investigar la extensión y presencia de la lepra en ardillas rojas salvajes en el norte del Reino Unido, analizamos 220 muestras de sangre/fluidos de cavidad corporal de ardillas rojas muestreadas de manera oportunista (2004-2023) en busca de anticuerpos específicos contra el glicolípido fenólico-I, un componente de la pared celular específico de estos bacilos de la lepra. Además, evaluamos el ADN derivado del bacilo mediante PCR en tiempo real (qPCR) en 250 orejas de la misma cohorte. El ADN de Mycobacterium leprae y Mycobacterium lepromatosis fue detectado por qPCR en el 20.4% y el 0.8% de las ardillas, respectivamente. No se observaron casos de co-detección. Se observaron niveles detectables de anticuerpos anti-PGL-I mediante UCP-LFA en el 52.9% de los animales con la presencia de Mycobacterium leprae determinada por qPCR, y en general en el 15.5% de todos los animales. En total, el 22.6% (n = 296) de esta cohorte del Reino Unido tuvo al menos alguna exposición a los bacilos de la lepra. Nuestro estudio muestra que los bacilos de la lepra persisten en las ardillas rojas en el norte del Reino Unido, enfatizando la necesidad de un monitoreo molecular y serológico continuo para estudiar la ecología de la lepra en las ardillas rojas, obtener información sobre la posible transmisión zoonótica y determinar si la enfermedad tiene un impacto en la conservación de esta especie en peligro.