Las células vegetales secretan vesículas de tamaño micrométrico y nanométrico encerradas en membranas que, al igual que las vesículas extracelulares (EVs) liberadas por células de mamíferos o bacterias, transportan una carga molecular compleja de proteínas, ácidos nucleicos, lípidos y metabolitos primarios y secundarios. Aunque es técnicamente complicado aislar EVs de plantas enteras o de sus tejidos, los cultivos celulares vegetales in vitro proporcionan excelentes sistemas modelo para su estudio. Se han aislado EVs vegetales de los medios de cultivo condicionados de cultivos de células vegetales, polen, raíces peludas y protoplastos, y estudios recientes han recopilado datos estructurales y biológicos importantes que proporcionan un marco para descifrar sus roles fisiológicos y desvelar vínculos previamente no reconocidos con sus diversas funciones biológicas. La función principal de las EVs vegetales parece estar en la secreción que subyace al crecimiento celular y la morfogénesis, la composición de la pared celular y los procesos de comunicación célula-célula. Además de sus funciones fisiológicas, las EVs vegetales pueden participar en mecanismos de defensa contra diferentes patógenos de las plantas, incluidos hongos, virus y bacterias. Mientras que las nanovesículas derivadas de plantas comestibles y medicinales aisladas de materiales vegetales homogeneizados ex vivo son ampliamente estudiadas y explotadas, hoy en día, la investigación sobre EVs vegetales aún está en su infancia. Esta revisión, por primera vez, destaca las diferentes fuentes in vitro que se han utilizado para aislar EVs vegetales, junto con los estudios estructurales y biológicos que investigan la carga molecular, y señala el posible papel de las EVs vegetales como mediadores en las interacciones planta-patógeno, lo que puede contribuir a abrir nuevos escenarios para aplicaciones agrícolas, biotecnología y estrategias innovadoras para el manejo de enfermedades de las plantas.