La dermatitis atópica (DA) es una enfermedad cutánea inflamatoria crónica que está asociada con inflamación sistémica y modulación inmune. Anteriormente, hemos demostrado que los vesículos extracelulares resultantes de células madre mesenquimatosas derivadas del tejido adiposo humano (ASC-EVs) atenuaron los síntomas similares a la DA al reducir los niveles de múltiples citoquinas inflamatorias. Aquí, nuestro objetivo fue investigar la mejora de la DA canina al utilizar exosomas de ASC caninos en un modelo de ratón con DA inducida por Biostir. Además, realizamos estudios de toxicidad in vivo para determinar si estos afectaban a los órganos y su posible toxicidad. En primer lugar, aislamos ASCs caninos (cASCs) del tejido adiposo de un canino y caracterizamos los cASCs-EVs. Curiosamente, encontramos que los cASC-EVs mejoraron la dermatitis similar a la DA y disminuyeron notablemente los niveles de IgE sérica, el grosor de las orejas, las citoquinas inflamatorias y quimioquinas como IL-4 e IFN- de manera dependiente de la dosis. Además, no hubo toxicidad sistémica en estudios de toxicidad de dosis única o repetida utilizando ratones ICR. Además, analizamos arreglos de miARN de cASC-EVs utilizando secuenciación de nueva generación (NGS) para investigar el papel de los miARN en la mejora de las respuestas inflamatorias. En conjunto, nuestros resultados sugieren que los cASC-EVs atenuan eficazmente la DA al transportar miARN antiinflamatorios a las lesiones atópicas, sin hallazgos toxicológicos, lo que resulta en una opción terapéutica prometedora sin células para el tratamiento de la DA canina.