En los últimos años, el conocimiento sobre las funciones de los vesículos extracelulares (EV) liberados por las células ha crecido rápidamente. Los EV son vesículos de membrana cargados con proteínas, ácidos nucleicos, lípidos y moléculas bioactivas. Una vez liberados en el espacio extracelular, los EV son entregados a células objetivo que pueden experimentar modificaciones en condiciones fisiológicas o patológicas. Los EV son nano transportadores con un papel crucial en la promoción de la comunicación célula-célula a corta y larga distancia. La comprensión del mecanismo que regula este proceso es un beneficio tanto para la medicina como para la ciencia básica. Actualmente, los EV atraen un inmenso interés en la medicina de precisión y la nanomedicina por su potencial uso en diagnóstico, pronóstico y terapias. Esta revisión informa sobre los últimos avances en estudios de EV, centrándose en la naturaleza y características de los EV y en las metodologías convencionales y emergentes utilizadas para su separación, caracterización y visualización. Al buscar una porción extensa de la literatura relevante, este trabajo tiene como objetivo ofrecer un resumen de los avances en las aplicaciones nanomédicas de los EV. Además, se discuten las preocupaciones que requieren más estudios antes de su traducción a aplicaciones clínicas.