El péptido similar a la insulina 3 (INSL3) es un producto constitutivo de las células de Leydig maduras y de tipo adulto de los testículos y, por lo tanto, en la mayoría de los mamíferos es un biomarcador ideal para monitorear el desarrollo puberal. Se desarrolló y validó un nuevo inmunoensayo de fluorescencia temporal heteróloga para medir el INSL3 circulante en la sangre de perros machos adultos. En comparación con otras especies, la concentración de INSL3 es baja con una marcada variación entre individuos, que parece ser independiente de la raza, la edad o el peso. Luego se utilizó un sistema modelo en el que un grupo de perros beagle fue sometido a un implante de agonista de GnRH para suprimir el eje HPG y la espermatogénesis, seguido de la extracción del implante y la recuperación. A diferencia de la testosterona, los niveles de INSL3 no fueron completamente suprimidos en todos los animales por el agonista de GnRH, ni la recuperación de la función de las células de Leydig tras la extracción del implante fue uniforme o completa, incluso después de varias semanas. En los perros, y a diferencia de otras especies (incluidos los humanos), el INSL3 de las células de Leydig parece ser bastante variable entre perros individuales y solo débilmente conectado a la fisiología del eje HPG después de su supresión por un implante de agonista de GnRH y la recuperación. En consecuencia, el INSL3 puede ser menos útil en esta especie para la evaluación de la función testicular.