El río Iguazú es un afluente de la margen izquierda del río Paraná, aislado de esta cuenca hace unos 22 millones de años con la aparición de las Cataratas del Iguazú. El río Iguazú se caracteriza por un alto endemismo debido a dos factores: su topografía accidentada y el antiguo aislamiento causado por la formación de las Cataratas del Iguazú. Este estudio analizó citogenéticamente una población de Glanidium ribeiroi recolectada en una región del tramo final de esta cuenca, mediante tinción de Giemsa, bandeo C, impregnación con nitrato de plata y FISH con sondas de ADNr 5S, ADNr 18S, secuencia telomérica [TTAGGG]n y repeticiones [GATA]n. El número diploide fue de 58 cromosomas. La heterocromatina estaba presente en la región terminal de casi todos los cromosomas. Los Ag-NOR fueron simples y se presentaron intersticialmente en el brazo corto del par submetacéntrico 14, lo cual se confirmó mediante FISH con sonda de ADNr 18S. La FISH con ADNr 5S marcó únicamente el par submetacéntrico 16 del brazo largo en posición intersticial. La FISH con sonda [TTAGGG]n presentó todos los telómeros marcados como se esperaba, con ausencia de secuencia telomérica intersticial (ITS). La secuencia repetitiva [GATA]n se dispersó por todo el genoma, con una ubicación preferencial en la región terminal de todos los cromosomas. Los datos obtenidos se discuten en este trabajo con otras especies de Auchenipteridae y otras poblaciones de G. ribeiroi del río Iguazú previamente analizadas, verificando las diferencias entre estas poblaciones, que deberían estar relacionadas principalmente con la topografía accidentada de esta cuenca.