Las nuevas tendencias en el consumo de uvas de mesa y el creciente interés por el impacto ambiental de este cultivo han llevado a los criadores hacia el desarrollo de cultivares sin semillas dotados de resistencia, a través de programas de cruzamiento. Para obtener uvas sin semillas, el uso de técnicas de rescate de embriones es fundamental. En esta investigación, se optimizó y validó un protocolo de cultivo de embriones de uva utilizando 39 cultivares y 41 combinaciones de cruces realizadas en el marco de un gran programa privado de uvas de mesa de la red privada Italian Variety Club en el período 2017-2021, evaluando varios factores, como la mejora en la formación de embriones, la germinación y el crecimiento, y el desarrollo de plantones. Se evaluó la actitud del cultivo de embriones de los cruces entre diferentes combinaciones de padres sin semillas, y las tasas de desarrollo de embriones de los óvulos extraídos oscilaron principalmente entre el 3.5 y el 35.5%, con 5 de 43 genotipos como valores atípicos. Los experimentos realizados en diferentes momentos de muestreo, en un rango de 43 a 62 días después de la polinización (DAP), no mostraron diferencias significativas entre las muestras analizadas, mientras que la tasa de embriones desarrollados con el protocolo aplicado demostró su empleabilidad en múltiples genotipos, aunque el genotipo de la vid influyó significativamente en la eficiencia de la técnica.