El tamaño pequeño en los mamíferos generalmente restringe el monitoreo a largo plazo y frecuente de la función endocrina utilizando plasma como matriz. Por lo tanto, el monitoreo no invasivo de las concentraciones de metabolitos hormonales en excreta puede proporcionar un enfoque invaluable. El objetivo del presente estudio fue examinar la idoneidad de los ensayos inmunoenzimáticos (EIA) para monitorear las respuestas a los estresores en el topo desnudo (NMR) utilizando orina y heces como matrices hormonales. Se realizó una administración de control salino y un desafío de hormona adrenocorticotrópica (ACTH) de alta y baja dosis en seis machos y seis hembras de NMR de morfo dispersor. Los resultados revelaron que un EIA de 5alpha-pregnane-3beta,11beta,21-triol-20-one que detecta metabolitos glucocorticoides (GCM) con una estructura de 5alpha-3beta-11beta-diol es el ensayo más adecuado para medir concentraciones en muestras de orina masculina, mientras que un EIA de 11-oxoaetiocholanolona que detecta GCM con una estructura de 5beta-3alpha-ol-11-one parece ser el EIA más adecuado para cuantificar GCM en orina femenina. Un EIA de 11-oxoaetiocholanolona que detecta 11,17 dioxoandrostanes fue el EIA más adecuado para cuantificar GCM en las heces de ambos sexos. Hubo diferencias relacionadas con el sexo en la respuesta al desafío de ACTH de alta y baja dosis. Recomendamos utilizar heces como una matriz más adecuada para el monitoreo no invasivo de GCM en NMR, lo que puede ser valioso al investigar las condiciones de alojamiento y otros aspectos del bienestar.