Se llevó a cabo un experimento de alimentación de 12 semanas para evaluar los efectos de reemplazar el aceite de pescado (FO) con sebo de res (BT) en la composición de ácidos grasos del pez globo tigre de cultivo. Se utilizaron dos estrategias de reemplazo: una Reemplazo Dietético Gradual estándar de FO con BT (estrategia GDR) y Alimentación Alternada entre Dietas a base de FO y BT (estrategia AFD). Las dietas de control positivo y negativo se formularon con un 6% de FO (grupo FO-C) o BT (grupo BT-C) como la única fuente de lípidos añadidos. En la estrategia GDR, se formularon tres dietas experimentales, con un 25, 50 y 75% del FO añadido en la dieta FO-C reemplazado por BT, denominadas 25BT, 50BT y 75BT, respectivamente. En la estrategia AFD, se aplicaron patrones de alimentación alternados entre la dieta FO-C y la dieta BT-C, a saber, 1, 2 y 3 semanas con BT-C seguidas de 1 semana de alimentación con FO-C (1BT-1FO, 2BT-1FO y 3BT-1FO, respectivamente). Cada dieta o estrategia de alimentación se asignó a tanques en triplicado. Los resultados mostraron que la inclusión de BT en la dieta redujo los contenidos de ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (LC-PUFA) tanto en el músculo como en el hígado (tejidos comestibles para esta especie) de los peces experimentales, y el hígado mostró una disminución más drástica que el músculo. El contenido de LC-PUFA disminuyó linealmente con la disminución de los niveles de FO en la dieta en la estrategia GDR. Sin embargo, en la estrategia AFD, no se observó una relación lineal entre el contenido de LC-PUFA y la duración de la alimentación con FO. El tratamiento 3BT-1FO resultó en un mayor contenido de LC-PUFA que 2BT-1FO. Al comparar las dos estrategias con el mismo nivel final de administración de FO, a saber, 50BT frente a 1BT-1FO, y en particular, 75BT frente a 3BT-1FO, la estrategia AFD resultó en mayores contenidos de LC-PUFA tanto en el músculo como en el hígado que la estrategia GDR. En conclusión, cuando se reemplazó el FO por BT en las dietas, la alimentación alternada entre dietas a base de FO y BT resultó en un mayor contenido de LC-PUFA que el reemplazo directo estándar. Tres semanas de alimentación con BT-C seguidas de una semana de alimentación con FO-C parecieron ser un buen patrón de alimentación alternada. Este estudio proporcionó una estrategia prometedora de ahorro de FO en la acuicultura cuando se mantuvieron los contenidos de LC-PUFA lo más altos posible.