El cambio en los estándares de bienestar animal hacia la cría en libertad de gallinas ponedoras en la UE ha planteado preguntas sobre los cambios en la composición dietética. La evaluación precisa de la ingesta de material vegetal al aire libre es crucial para estrategias de alimentación efectivas. Este estudio presenta un enfoque utilizando n-alcanos como marcadores para determinar la ingesta de plantas en gallinas ponedoras, que implica la evaluación de la tasa de recuperación de n-alcanos, análisis discriminante y resolución de ecuaciones lineales para la evaluación cualitativa y cuantitativa, respectivamente, considerando combinaciones sistemáticas de n-alcanos. Se probaron dos dietas: una dieta comercial estándar y una dieta que incorpora un 1% de alfalfa. Los análisis químicos mostraron un perfil de n-alcanos alterado debido a la inclusión de alfalfa, resultando en tasas de recuperación que oscilan entre el 30% y el 44% dependiendo del tipo de n-alcano y la dieta. El análisis estadístico reveló diferencias significativas en las tasas de recuperación entre los diferentes alcanos para las mismas dietas y entre las dietas para el mismo alcano, junto con una interacción entre la longitud de la cadena de carbono del n-alcano y la concentración inicial en la dieta. El método predijo con precisión la inclusión de plantas, con una ligera sobreestimación (2.80%) utilizando la combinación C25-C29-C33. Se observó una clasificación cualitativa precisa de los animales basada en los perfiles de n-alcanos fecales. El estudio demostró con éxito la utilidad de los n-alcanos para estimar la composición dietética, proporcionando un enfoque no invasivo para futuros estudios de cría en libertad.