La infusión de islotes pancreáticos en la vena portal representa actualmente el enfoque preferido para el trasplante de islotes, a pesar de la considerable pérdida de masa de islotes casi inmediatamente después de la implantación. Por lo tanto, se necesitan urgentemente enfoques que eviten la colocación intravascular directa. Un candidato prometedor para la colocación extrahepática es el omento. Nuestro objetivo fue desarrollar un esqueleto de matriz extracelular a partir del páncreas nativo que pudiera proporcionar un microentorno para la supervivencia de los islotes en un colgajo omental. Con ese fin, comparamos diferentes enfoques de descelularización, incluyendo la perfusión a través del conducto pancreático, la arteria gástrica, la vena portal y un nuevo método a través de la vena esplénica. Los esqueletos descelularizados se compararon por tamaño, contenido de ADN residual, composición de proteínas, histología, microscopía electrónica y resonancia magnética después de la repoblación con islotes aislados. En comparación con los otros enfoques, la perfusión pancreática a través de la vena esplénica proporcionó esqueletos de matriz extracelular más pequeños, lo que facilitó el trasplante en el omento, sin comprometer otros requisitos, como la eliminación completa de componentes celulares y la preservación de proteínas extracelulares pancreáticas. La resonancia magnética repetida de islotes pancreáticos etiquetados con óxido de hierro mostró que los islotes mantuvieron su posición in vivo durante 49 días. La microscopía electrónica de barrido ambiental avanzada demostró que los islotes permanecieron integrados con el esqueleto pancreático. Este nuevo enfoque representa una prueba de concepto para experimentos de trasplante a largo plazo.