El éxito del clonaje de perros requiere un número suficiente de ovocitos maduros in vivo como ovocitos receptores para la reconstrucción de embriones. La predicción precisa del día de ovulación en perras en celo es crítica para la recolección de ovocitos maduros. Tradicionalmente, se ha utilizado un rango específico de progesterona sérica (P4) en el sistema de radioinmunoanálisis (RIA) para la predicción de la ovulación. En este estudio, investigamos el uso de un sistema de ensayo de fluorescencia ligado a enzimas (ELFA) para la medición de P4. Se analizaron muestras de suero de perras en celo utilizando tanto RIA como ELFA, y los valores de P4 medidos por ELFA se clasificaron en 11 grupos basados en la concentración estándar medida en RIA y se compararon. Además, para examinar la tendencia de los cambios en los valores de P4 en cada sistema, se compararon los valores de P4 en el día de ovulación (desde D - 6 hasta D + 1) en ambos sistemas. El rango de ELFA de 5.0-12.0 ng/mL se derivó del rango estándar de RIA de 4.0-8.0 ng/mL. Las tasas de ovocitos maduros adquiridos en RIA y ELFA fueron del 55.47% y 65.19%, respectivamente. El sistema ELFA produjo con éxito cachorros clonados después de la transferencia de los ovocitos clonados reconstruidos. Nuestros hallazgos sugieren que el sistema ELFA es adecuado para obtener ovocitos maduros in vivo para el clonaje de perros.