La optimización de las fuentes de nitrógeno (N) tiene el potencial de mejorar el ahijado del trigo, la eficiencia en el uso del nitrógeno (NUE) y el rendimiento del grano, sin embargo, los mecanismos subyacentes siguen siendo poco claros. Este estudio hipotetiza que la combinación de fuentes específicas de N puede aumentar el contenido de ribósido de zeatina + zeatina (ZR + ZT) en los nudos de los ahijados y mantener una mayor relación ZR + ZT/giberelina A7 (GA), promoviendo así el desarrollo de los ahijados, mejorando la NUE y aumentando el rendimiento. Se investigaron los efectos de los tratamientos con fuentes de N en dos cultivares de trigo, el de espiga múltiple Shannong 28 (SN28) y el de espiga grande Tainong 18 (TN18). Se probaron un total de siete tratamientos de N: sin nitrógeno (N0), urea (N1), nitrato de calcio (N2), cloruro de amonio (N3), y dosis iguales de urea y nitrato de calcio (N4), urea y cloruro de amonio (N5), y nitrato de calcio y cloruro de amonio (N6). Los resultados mostraron que el tratamiento N4 aumentó significativamente los niveles de ZR y ZT en los nudos de los ahijados, mientras mantenía una mayor relación ZR + ZT a GA. Este cambio hormonal promovió la formación de ahijados y la acumulación de biomasa. Bajo N4, ambos cultivares exhibieron el mayor número de espigas efectivas y biomasa en los ahijados de orden superior. N4 también mejoró la acumulación de N en los granos, la eficiencia de absorción de N y la translocación de N, mientras reducía la pérdida de N. En comparación con N1, el número de espigas efectivas aumentó en un 7.8% en SN28 y un 5.6% en TN18, resultando en un aumento del 6.4% en el rendimiento de grano para SN28 y un aumento del 2.2% para TN18. En conclusión, la aplicación combinada de urea y nitrato de calcio optimiza la regulación hormonal, mejora la NUE y aumenta significativamente el ahijado del trigo y el rendimiento del grano, proporcionando una estrategia prometedora para mejorar la productividad del trigo.