Las disminuciones de temperatura son el estándar de oro al establecer estrategias de control para procesos de cultivo celular de mamíferos. Estos cambios se realizan para prolongar las fases de producción y alcanzar niveles más altos de productividad. Sin embargo, para el desarrollo de biosimilares, el cuello de botella está en lograr una calidad de producto preespecificada. En un proyecto de desarrollo en etapa tardía, investigamos el impacto de cambios de temperatura y otros parámetros del proceso con el objetivo de optimizar el perfil de glicosilación de un anticuerpo monoclonal (mAb). Aplicamos un enfoque de diseño de experimentos a escala de 3 L. El perfil de glicosilación óptimo se logró al realizar un aumento de temperatura de 35.8 gradosC a 37 gradosC. El glicano afucosilado total (TAF) disminuyó un 1.2%, y las especies de glicano galactosilado (GAL) aumentaron hasta un 4.5%. La estrategia de control optimizada luego se implementó con éxito a escala de fabricación (1000 L). Al probar dos conjuntos de puntos de ajuste a escala de fabricación, demostramos que los modelos estadísticos que predicen TAF y GAL entrenados con datos a pequeña escala son representativos a escala de fabricación. Esperamos que este estudio anime a los investigadores a ampliar los rangos de selección en el desarrollo de procesos e investigar si los aumentos de temperatura también son beneficiosos para otros mAbs.