El cambio climático impacta profundamente la salud, productividad y resiliencia de los ecosistemas forestales y amenaza la sostenibilidad de los productos forestales y las industrias basadas en la madera. Las innovaciones para mejorar el crecimiento, desarrollo y adaptación de los árboles ofrecen oportunidades sin precedentes para fortalecer la resiliencia del ecosistema y mitigar los efectos del cambio climático. Aquí, establecimos un método para la aislamiento de protoplastos, purificación y entrega de ribonucleoproteínas (RNP) CRISPR-Cas como un paso hacia la aceleración de la mejora genética de estas especies de árboles coníferos. En este sistema, se pudieron aislar protoplastos purificados de embriones somáticos con hasta 2 x 10 protoplastos/g de tejido y se transfectaron con proteínas y nucleótidos, logrando eficiencias de entrega de hasta el 13.5%. La entrega de RNP funcionales dirigidas a y en alcanzó eficiencias de edición genética que llegaron al 2.1% y 0.3%, respectivamente. Esta demostración de entrega de RNP para la edición del genoma sin ADN en los protoplastos de y ilustra el potencial de CRISPR-Cas para mejorar los rasgos de valor en especies de árboles ecológica y económicamente importantes. El sistema de edición proporciona una base para futuros esfuerzos para regenerar árboles forestales editados genéticamente para mejorar la salud del ecosistema y la sostenibilidad de los recursos naturales.