La capa lipídica que rodea la membrana vitelina de los huevos de insectos tiene un papel crítico en la impermeabilización y resistencia a la desecación de los embriones. Sin embargo, esta capa lipídica también impide el flujo de sustancias químicas hacia los embriones, como los crioprotectores, que son necesarios para una criopreservación exitosa. Los estudios de permeabilización de embriones de gusano de seda siguen siendo insuficientes. Por lo tanto, en este estudio, desarrollamos un método de permeabilización para eliminar la capa lipídica en el gusano de seda y examinamos los factores que afectan la viabilidad de los embriones descorionados, incluyendo los tipos y tiempos de exposición a sustancias químicas y las etapas embrionarias. Entre las sustancias químicas utilizadas, el hexano y el heptano fueron efectivos para la permeabilización, mientras que el Tritón X-100 y el Tween-80 fueron menos efectivos. En cuanto a las etapas embrionarias, hubo diferencias significativas entre 160 y 166 horas después de la puesta de los huevos a 25 grados Celsius. En consecuencia, encontramos que el tratamiento de los embriones de 160 horas después de la puesta con hexano durante 30 segundos fue la mejor condición para la permeabilidad y viabilidad de los embriones, en la que más del 62% de los embriones permeabilizados llegaron a la segunda instar larval y sus polillas pudieron poner huevos fertilizados. Nuestro método se puede utilizar para varios propósitos, incluidas investigaciones de permeabilidad utilizando otras sustancias químicas y la criopreservación embrionaria.