Antecedentes: La terapia fotodinámica antimicrobiana (PDT) se ha introducido como una opción potencial para el tratamiento de la periimplantitis. El objetivo de este estudio es evaluar el efecto antimicrobiano de una técnica novedosa que implica una combinación de luz láser de diodo de 445 nm con una solución de riboflavina al 0.1% (utilizada como un colorante fotosensibilizante) aplicada en un biofilm bacteriano-fúngico formado en implantes y comparar el rendimiento de esta técnica con el de la combinación comúnmente utilizada de láser de diodo de 660 nm con colorante de azul de metileno al 0.1%. Métodos: Se realizó un estudio in vitro en 80 implantes dentales de titanio contaminados con especies de SA y CA. Los implantes se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: control negativo (NC), sin tratamiento de superficie; control positivo (PC), tratado con una solución a base de clorhexidina al 0.2%; PDT1, 660 nm (EasyTip 320 um, 200 mW, Q power = 100 mW, 124.34 W/cm, 1240 J/cm) con colorante de azul de metileno al 0.1%; y PDT2, 445 nm (EasyTip 320 um, 200 mW, Q power = 100 mW, 100 Hz, 124.34 W/cm, 1.24 J/cm) con colorante de riboflavina al 0.1%. Resultados: Los grupos PDT1 y PDT2 mostraron una mayor reducción de SA y CA en comparación con el grupo NC y no se observaron diferencias significativas en comparación con el grupo PC. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos PDT1 y PDT2. Conclusiones: Un tratamiento antimicrobiano novedoso que implica una combinación de luz láser de diodo de 445 nm con solución de riboflavina mostró eficacia en la reducción de la formación de biofilm de SA y CA en superficies de implantes dentales, comparable a la de la terapia PDT más comúnmente utilizada que consiste en luz láser de diodo de 660 nm con colorante de azul de metileno o tratamiento de CHX al 0.2%.