Transformación de café (Coffea Arabica L. cv. Catimor) con el gen cry1ac mediante biolística, sin el uso de marcadores
Autores: De Guglielmo-Cróquer, Z; Altosaar, I; Zaidi, M; Menéndez-Yuffá, A
Idioma: Inglés
Editor: Takako Matsumura-Tundisi
Año: 2010
Acceso abierto
Transformación de café (Coffea Arabica L. cv. Catimor) con el gen cry1ac mediante biolística, sin el uso de marcadores
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La transformación de plántulas de café con el gen cry1ac de Bacillus thuringiensis se logró mediante biolística utilizando el plásmido pUBC completo o solo el casete genético ubi-cry1ac-nos. El gen cry1ac se insertó en plantas de café para conferir resistencia al minador de hojas Leucoptera coffeella, un insecto responsable de pérdidas considerables en los cultivos de café. Teniendo en cuenta que los casetes genéticos utilizados para este estudio carecen de genes reporteros y/o genes marcadores de selección, los parámetros para el procedimiento de transformación mediante biolística se estandarizaron previamente con un plásmido que contiene el gen reportero gus. La presencia del gen cry1ac en tejidos de plántulas jóvenes se determinó mediante PCR, Southern blot y PCR con transcripción reversa. Nuestros resultados muestran que es factible obtener plántulas de café viables, transformadas mediante bombardeo con el gen cry1ac y sin marcadores de selección ni genes reporteros.
La transformación de plántulas de café con el gen cry1ac de Bacillus thuringiensis se logró mediante biolística utilizando el plásmido pUBC completo o solo el casete genético ubi-cry1ac-nos. El gen cry1ac se insertó en plantas de café para conferir resistencia al minador de hojas Leucoptera coffeella, un insecto responsable de pérdidas considerables en los cultivos de café. Teniendo en cuenta que los casetes genéticos utilizados para este estudio carecen de genes reporteros y/o genes marcadores de selección, los parámetros para el procedimiento de transformación mediante biolística se estandarizaron previamente con un plásmido que contiene el gen reportero gus. La presencia del gen cry1ac en tejidos de plántulas jóvenes se determinó mediante PCR, Southern blot y PCR con transcripción reversa. Nuestros resultados muestran que es factible obtener plántulas de café viables, transformadas mediante bombardeo con el gen cry1ac y sin marcadores de selección ni genes reporteros.