El plomo (Pb) es una fuente importante de contaminación por metales pesados y representa una amenaza para la biodiversidad y la salud humana. Los niveles elevados de Pb pueden obstaculizar el crecimiento y desarrollo de los insectos, llevando a la apoptosis a través de mecanismos como el daño oxidativo. El intestino medio de los gusanos de seda es el principal órgano expuesto a metales pesados. Como un insecto modelo lepidóptero de importancia económica en China, el estrés inducido por metales pesados en los gusanos de seda causa pérdidas considerables en la sericultura, lo que provoca un daño económico sustancial. Este estudio tuvo como objetivo investigar los genes relacionados con la desintoxicación inducidos por Pb en el intestino medio de los gusanos de seda utilizando métodos de secuenciación de alto rendimiento para lograr una comprensión más profunda de las reacciones de los genes a la exposición al plomo. Este estudio identificó 11,567 unigenes y 14,978 transcritos. Se seleccionaron un total de 1265 genes expresados diferencialmente (DEGs), que comprenden 907 genes sobreexpresados y 358 genes subexpresados. Posteriormente, el análisis de clasificación de Gene Ontology (GO) reveló que los 1265 DEGs estaban distribuidos en procesos biológicos, componentes celulares y funciones moleculares. Esto sugiere que el intestino medio del gusano de seda puede afectar diversas funciones de orgánulos y procesos biológicos, proporcionando pistas cruciales para una exploración adicional de la función de los DEG. Además, los niveles de expresión de 12 DEGs seleccionados relacionados con la desintoxicación se validaron utilizando qRT-PCR, lo que confirmó la fiabilidad de los resultados de RNA-seq. Este estudio no solo proporciona nuevas perspectivas sobre los mecanismos de defensa de desintoxicación de los gusanos de seda tras la exposición al Pb, sino que también establece una base valiosa para una investigación más profunda sobre los mecanismos moleculares de desintoxicación en los gusanos de seda.