Durante la curación de heridas corneales, los queratocitos corneales están expuestos a señales biofísicas y solubles que los hacen transformar de un estado quiescente a un fenotipo de reparación. No se comprende bien cómo los queratocitos integran estas múltiples señales simultáneamente. Para investigar este proceso, se cultivaron queratocitos corneales primarios de conejo en sustratos con patrones de fibrillas de colágeno alineadas y recubiertos con fibronectina adsorbida. Después de 2 o 5 días de cultivo, los queratocitos fueron fijados y teñidos para evaluar cambios en la morfología celular y marcadores de activación miofibroblástica mediante microscopía de fluorescencia. Inicialmente, la fibronectina adsorbida tuvo un efecto activador sobre los queratocitos, como lo evidencian los cambios en la forma celular, la formación de fibras de tensión y la expresión de actina alfa de músculo liso (alfa-SMA). La magnitud de estos efectos dependió de la topografía del sustrato (es decir, sustrato plano frente a fibrillas de colágeno alineadas) y disminuyó con el tiempo de cultivo. Cuando los queratocitos fueron expuestos simultáneamente a fibronectina adsorbida y al factor de crecimiento derivado de plaquetas-BB (PDGF-BB) soluble, las células se alargaron y tuvieron una expresión reducida de fibras de tensión y alfa-SMA. En presencia de PDGF-BB, los queratocitos sembrados en las fibrillas de colágeno alineadas se alargaron en la dirección de las fibrillas. Estos resultados proporcionan nueva información sobre cómo los queratocitos responden a múltiples señales simultáneas y cómo la topografía anisotrópica de las fibrillas de colágeno alineadas influye en el comportamiento de los queratocitos.