El desarrollo de modelos preclínicos estandarizados y reproducibles es esencial para avanzar en la investigación del mesotelioma pleural (PM). Aquí presentamos una técnica de inyección intrapleural transtorácica mínimamente invasiva, simple y confiable que podría mejorar la eficiencia de la generación de modelos de PM ortotópicos. Al incorporar una funda de aguja simple para controlar la profundidad de la inyección, este método elimina la necesidad de cirugía o anestesia general, reduciendo la complejidad técnica y el estrés animal mientras se garantiza una entrega precisa en la cavidad pleural. Demostramos la efectividad de este enfoque al lograr una tasa de injerto tumoral del 100% después de la inyección de células tumorales AE17. Además, esta técnica se ha utilizado con éxito para la inyección de fibras de asbesto en modelos de mesotelioma, destacando su versatilidad. Al proporcionar una alternativa más accesible y estandarizada a los métodos existentes, este protocolo mejora la fiabilidad de los modelos de PM y facilita una adopción más amplia por parte de los investigadores, incluidos aquellos con experiencia limitada en procedimientos invasivos.