El ácido guanidinoacético puede mejorar la calidad de la carne de cerdo. Estudios previos han demostrado que la calidad de la carne de cerdo está estrechamente relacionada con el tipo de fibra muscular mediado por PPARGC1A. Por lo tanto, este estudio tuvo como objetivo evaluar la influencia de la suplementación dietética con GAA en la transformación del tipo de fibra muscular esquelética. Un total de 180 cerdos machos castrados sanos de cruce Duroc x Landrace x Meishan con un peso promedio similar (90 +/- 1.5 kg) fueron divididos aleatoriamente en tres tratamientos con cinco repeticiones por tratamiento y 12 cerdos por repetición, incluyendo una dieta basal libre de GAA y una dieta basal con 0.05% o 0.10% de GAA durante 15 días. Nuestros resultados mostraron que la suplementación con 0.10% de GAA aumentó los contenidos de Ca en el sarcoplasma. En comparación con el grupo de control, ambos grupos de suplementación con GAA aumentaron la expresión de Troponina I-ss, y la suplementación con 0.10% de GAA redujo la expresión de Troponina T3. La suplementación con GAA aumentó la expresión del receptor activado por proliferadores de peroxisomas alfa coactivador 1 (PPARGC1A), y además aumentó la expresión del factor de transcripción mitocondrial A (TFAM), aumentó el nivel de potencial de membrana y las actividades de la cadena respiratoria mitocondrial complejo I, III. La suplementación con 0.10% de GAA aumentó la expresión proteica de la subunidad catalítica alfa de la calcineurina (CnAalfa) y del factor nuclear de células T activadas (NFATc1). En general, la suplementación dietética con GAA promueve la transformación de los tipos de fibras musculares esqueléticas de rápido a lento a través del aumento de la función mitocondrial basada en PPARGC1A y la activación de la vía CaN/NFAT en cerdos de acabado.