La adición de glicerina, vitamina C y niacinamida a las dietas de los cerdos aumentó el enrojecimiento; sin embargo, sigue sin estar claro cómo estos suplementos afectan la microbiota intestinal y los metabolitos. Un total de 84 lechones (20.35 +/- 2.14 kg) fueron asignados aleatoriamente a los grupos A (control), B (suplementado con glicerina), C (suplementado con vitamina C y niacinamida) y D (suplementado con glicerina, vitamina C y niacinamida) durante un experimento de alimentación. Se utilizaron tecnologías metagenómicas y metabolómicas para analizar las composiciones fecales de ácidos biliares, metabolitos y microbiota. Los resultados mostraron que en comparación con los cerdos del grupo A, los cerdos del grupo D tenían menores expresiones de factores de virulencia de lipopolisacáridos (< 0.05), sistema de resistencia a ácidos grasos (< 0.05) y cápsula (< 0.01); niveles fecales más altos de ion férrico (< 0.05), ácido alolitoquólico (< 0.01), ácido desoxicólico (< 0.05), ácido tauroursodeoxicólico dihidratado (< 0.01), ácido glicodeoxicólico (< 0.05), L-prolina (< 0.01) y calcitriol (< 0.01); y mayores abundancias (< 0.05) de microbiota que adquiere hierro. La suplementación con glicerina, vitamina C y niacinamida a los cerdos promovió significativamente el crecimiento de microbiota que adquiere hierro en las heces, redujo la expresión de algunos genes de factores de virulencia de patógenos fecales y aumentó los niveles fecales de ion férrico, L-prolina y algunos ácidos biliares secundarios. La administración de glicerol, vitamina C y niacinamida a los cerdos puede servir como una medida efectiva para mejorar el enrojecimiento muscular al alterar las composiciones de la microbiota fecal y los metabolitos.