El perro mapache es un omnívoro típico que posee una amplia adaptabilidad dietética y tolerancia a la alimentación áspera, lo que puede atribuirse a su microbiota intestinal. El estudio tuvo como objetivo investigar el efecto de los niveles de harina de alfalfa en el rendimiento de crecimiento, la digestibilidad aparente de nutrientes, los parámetros séricos y la microbiota intestinal de los perros mapache. Sesenta perros mapache fueron divididos aleatoriamente en cuatro tratamientos dietéticos que contenían 0% (AM0), 5% (AM5), 10% (AM10) y 15% (AM15) de harina de alfalfa durante un experimento de 60 días. Los resultados mostraron que, en comparación con los perros mapache alimentados con la dieta AM0, aquellos alimentados con las dietas AM5 y AM10 no presentaron diferencias significativas en el rendimiento de crecimiento, mientras que los alimentados con la dieta AM15 experimentaron una disminución significativa. Los perros mapache alimentados con la dieta AM5 no tuvieron un efecto significativo en la digestibilidad aparente de nutrientes. La suplementación dietética con harina de alfalfa disminuyó significativamente los niveles de urea sérica y aumentó la capacidad antioxidante de los perros mapache. El análisis del microbioma intestinal mostró que la riqueza y diversidad de la microbiota colónica aumentaron significativamente en el grupo AM15. Con el aumento en los niveles de harina de alfalfa en la dieta, la abundancia relativa de bacterias degradadoras de fibra en el colon de los perros mapache, como , , y , aumentó. Sin embargo, la abundancia relativa de bacterias patógenas, incluyendo , disminuyó. En conclusión, la inclusión del 5% de harina de alfalfa en la dieta de los perros mapache no tuvo efecto en el rendimiento de crecimiento, pero mostró el potencial para mejorar la capacidad antioxidante sérica y la microbiota intestinal. Esto indica que los perros mapache tienen una cierta tolerancia a la adición de harina de alfalfa en su dieta.