Las capacidades migratorias de las células madre humanas adultas son vitales para asegurar la regeneración endógena de tejidos y las aplicaciones clínicas basadas en células madre. Aunque se ha demostrado que el suero sanguíneo humano es beneficioso para la migración y proliferación celular, se sabe poco sobre su impacto en el comportamiento migratorio de las células madre cardíacas y las vías de señalización subyacentes. En este estudio, investigamos los efectos del suero sanguíneo humano en células madre cardíacas humanas primarias (hCSCs) del aurículo cardíaco adulto. A nivel técnico, aprovechamos una plataforma de cultivo microfluídica, que nos permitió caracterizar las morfologías celulares y rastrear la migración de hCSCs individuales mediante imágenes de células vivas durante un período de hasta 48 horas. Nuestros hallazgos mostraron una distancia y velocidad de migración significativamente aumentadas de hCSCs después del tratamiento con suero humano en comparación con el control. La exposición de hCSCs estimuladas por suero sanguíneo al inhibidor de la quinasa activada por mitógenos p38 (p38-MAPK) SB239063 resultó en una migración significativamente disminuida. Además, revelamos un aumento en la fosforilación de la proteína de choque térmico 27 (Hsp27) tras el tratamiento con suero, que se redujo por la inhibición de p38-MAPK. En resumen, demostramos que el suero sanguíneo humano es un potente inductor de la migración de células madre cardíacas humanas adultas dependiente de la señalización p38-MAPK/Hsp27. Nuestros hallazgos enfatizan aún más el gran potencial de los dispositivos de cultivo microfluídico para evaluar la dinámica de migración espaciotemporal de células madre humanas adultas a nivel de célula individual.