Se realizó un estudio retrospectivo de los resultados microbiológicos de laboratorio desde 2020 hasta 2022, obtenidos de un laboratorio de diagnóstico veterinario de la isla de Gran Canaria, España, centrado en casos de otitis canina. El objetivo de este estudio fue analizar la distribución de patógenos, la susceptibilidad a antimicrobianos, la prevalencia de fenotipos multirresistentes y el papel de las coinfecciones en los casos de otitis, con el fin de proporcionar evidencia actualizada que pudiera respaldar estrategias de control efectivas para esta patología prevalente. Se procesaron un total de 604 muestras para el diagnóstico de otitis externa canina. De las muestras analizadas, 472 fueron positivas para crecimiento bacteriano o fúngico (78.1%; IC del 95%: 74.8-81.4%). Se obtuvieron un total de 558 diagnósticos microbiológicos, divididos en 421 bacterianos (75.4%; IC del 95%: 71.8-79.0%) y 137 fúngicos (24.6%; IC del 95%: 20.9-28.1%), y fueron los microorganismos más prevalentes detectados en casos clínicos de otitis. Se encontró una alta resistencia antimicrobiana en (30.7%), (29.4%), (25.1%) y (19%). Se observaron fenotipos multirresistentes en el 47% de las bacterias aisladas. Además, se detectó una prevalencia del 26.4% de cepas resistentes a meticilina. La alta prevalencia de fenotipos resistentes a antimicrobianos en estas bacterias resalta la necesidad actual de contar con datos constantes y actualizados sobre prevalencia y susceptibilidad a antimicrobianos que puedan respaldar estrategias basadas en evidencia para abordar de manera efectiva esta preocupación de salud animal y pública.