Establecimiento de un sistema de detección combinado de serología y molecular para el virus del mosaico de Youcai y su aplicación en varias plantas hospedantes
Autores: Feng, Chenwei; Hua, Yanhong; Liu, Duxuan; Chen, Haoyu; Wu, Mingjie; Hua, Jing; Zhang, Kun
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Establecimiento de un sistema de detección combinado de serología y molecular para el virus del mosaico de Youcai y su aplicación en varias plantas hospedantes
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Agronomía y Ciencia de los Cultivos
Palabras clave
Virus
Método de diagnóstico
Anticuerpos
Técnicas de detección
Huéspedes
Serológico
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 32
Citaciones: Sin citaciones
El virus del mosaico de youcai (YoMV) puede infectar una amplia variedad de especies de cultivos, como , , , y , causando un daño económico sustancial. Este estudio tuvo como objetivo desarrollar un método de diagnóstico rápido, sensible y económico para YoMV. Logramos expresar y purificar con éxito la proteína recombinante His-CP en BL21, que se utilizó para inmunizar conejos blancos de Nueva Zelanda, generando anticuerpos policlonales de alto título (PAb-CP). Además, se perfeccionó un ensayo de amplificación isotérmica mediado por transcripción inversa basado en técnicas serológicas (S-RT-LAMP), combinando técnicas de detección serológica y molecular para mejorar la practicidad. Utilizando PAb-CP, desarrollamos cuatro técnicas para detectar YoMV: Western blot, ensayo de inmunotransferencia de punto, ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA) y S-RT-LAMP. Se analizaron aislamientos de YoMV de diversas regiones y hospedadores. Los resultados indicaron que PAb-CP fue altamente efectivo en la detección de YoMV en una variedad de hospedadores y aislamientos de diversas regiones. Este estudio llena una brecha importante en la detección serológica de YoMV y proporciona una herramienta práctica para el diagnóstico y control in situ de la infección por YoMV.
Descripción
El virus del mosaico de youcai (YoMV) puede infectar una amplia variedad de especies de cultivos, como , , , y , causando un daño económico sustancial. Este estudio tuvo como objetivo desarrollar un método de diagnóstico rápido, sensible y económico para YoMV. Logramos expresar y purificar con éxito la proteína recombinante His-CP en BL21, que se utilizó para inmunizar conejos blancos de Nueva Zelanda, generando anticuerpos policlonales de alto título (PAb-CP). Además, se perfeccionó un ensayo de amplificación isotérmica mediado por transcripción inversa basado en técnicas serológicas (S-RT-LAMP), combinando técnicas de detección serológica y molecular para mejorar la practicidad. Utilizando PAb-CP, desarrollamos cuatro técnicas para detectar YoMV: Western blot, ensayo de inmunotransferencia de punto, ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA) y S-RT-LAMP. Se analizaron aislamientos de YoMV de diversas regiones y hospedadores. Los resultados indicaron que PAb-CP fue altamente efectivo en la detección de YoMV en una variedad de hospedadores y aislamientos de diversas regiones. Este estudio llena una brecha importante en la detección serológica de YoMV y proporciona una herramienta práctica para el diagnóstico y control in situ de la infección por YoMV.