Un metal traza individual presente en un suelo en su valor de evaluación ecológica o nivel de investigación (disparador/límite) se espera que cause fitotoxicidad. Sin embargo, la fitotoxicidad puede ser inducida por una mezcla de múltiples metales, cada uno presente a una concentración inferior al nivel de investigación correspondiente. Para investigar el impacto acumulativo de los metales presentes por debajo de sus niveles de investigación individuales, se llevaron a cabo tres ensayos sucesivos de fitotoxicidad en un invernadero utilizando la planta de triticale CrackerJack (Triticosecale rimpaui), un cultivo de cereal, en un suelo ácido arenoso tratado conjuntamente con Cd, Cu y Zn a diversas tasas. Se monitoreó la germinación de semillas y el crecimiento de plántulas. Las tasas de metales en los dos primeros ensayos fueron demasiado tóxicas o no tóxicas. En el tercer ensayo, se encontró que la mezcla de Cd, Cu y Zn a tasas de 2.5, 97.5 y 188 mg kg-1, respectivamente, no afectó la germinación de semillas, pero causó una ligera reducción en el crecimiento de las plantas. Aunque las concentraciones de metales utilizadas fueron inferiores al Nivel de Investigación Ecológica Australiano (Urbano) para Cd, Cu y Zn, que son 3.0, 100 y 200 mg kg-1, respectivamente, la reducción ocurrió debido a la sinergia. Se concluyó que, para mejorar la utilidad de los límites de investigación ambiental, deben considerarse los efectos sinérgicos de múltiples metales presentes a niveles ligeramente por debajo de los límites establecidos.