El aumento de la población de reptiles ha llevado a un incremento en el número de infecciones zoonóticas debido al contacto cercano con reptiles, siendo la salmonelosis asociada a reptiles particularmente relevante. La invasión de la serpiente rey de California no solo amenaza la población de reptiles endémicos de la isla de Gran Canaria (España), sino que también plantea serios problemas de salud pública al propagar patógenos zoonóticos y su resistencia a los antimicrobianos (RAM) en el medio ambiente. Así, el objetivo de este estudio fue evaluar la ocurrencia, diversidad genética y RAM entre cepas de spp. aisladas de serpientes rey de California en la isla de Gran Canaria (España). De 73 individuos invasores capturados, el 20.5% portaba spp., pertenecientes a diferentes subespecies y serovares, siendo subsp. la más abundante. La electroforesis en gel de campo pulsado mostró una alta diversidad genética entre los aislamientos de subsp., y entre estos, el 73.3% mostró resistencia a al menos uno de los antimicrobianos probados. En conclusión, el presente estudio reveló la importancia de las serpientes rey de California invasoras como reservorios de spp. resistentes a medicamentos que podrían representar una amenaza directa para el ganado y los humanos. La identificación de cepas resistentes a medicamentos en la vida silvestre proporciona información valiosa sobre las posibles rutas de transmisión que implican riesgos para la salud pública y animal.