La leishmaniosis canina (CanL) es una enfermedad crónica, sistémica y a menudo grave. El principal agente causante de CanL es un parásito protozoario, con los flebótomos actuando como vectores. En Europa y otros continentes, también es responsable de leishmaniosis en otros animales, como gatos, caballos y humanos. En Portugal, la leishmaniosis animal y humana es endémica, y se han reportado altos niveles de prevalencia de infecciones y enfermedades en perros. Existe un prejuicio contra los animales callejeros y también aquellos alojados en refugios, asumiendo que tienen niveles más altos de infección con patógenos transmitidos por vectores, en comparación con los animales domésticos. En el noreste de Portugal, se obtuvieron muestras de suero de marzo a mayo de 2022 en tres refugios (n = 179) y trece clínicas veterinarias (n = 164), resultando en 343 perros analizados para anticuerpos contra spp. mediante la prueba de aglutinación directa (DAT). La seroprevalencia general fue del 9.9%, con una seroprevalencia del 15.2% en perros domésticos y del 5.0% en los de refugio (p = 0.003). El hecho de que los perros de refugio tuvieran una seroprevalencia más baja podría explicarse por la atención veterinaria más regular proporcionada en los refugios en cuanto a medidas preventivas, incluyendo insecticidas con efecto antialimentación, en comparación con los perros domésticos.