La presente investigación tuvo como objetivo estudiar la composición proximal, el perfil de ácidos grasos, la actividad antioxidante, el contenido total de fenoles y el contenido de N-Cafeoiltiamina de tres variedades distintas de semillas de cáñamo, cultivadas en una zona mediterránea (Italia Central), como alimento en la dieta de los animales de granja. La composición proximal se determinó utilizando los métodos oficiales de análisis; el perfil de ácidos grasos se determinó por cromatografía de gases, el contenido total de fenoles (TPC) y la actividad de captura (DPPH y ABTS) por el método colorimétrico, y el contenido de N-Cafeoiltiamina por análisis HPLC. La semilla de cáñamo mostró el mayor contenido total de lípidos y la mejor actividad antioxidante con el mayor TPC, contenido de N-Cafeoiltiamina y ABTS, y el índice de peroxidación y DPPH más bajo; mostró el mejor perfil de ácidos grasos e índices nutricionales (índices aterogénicos y trombogénicos y la relación hipocolesterolémica/hipercolesterolémica), y mostró el mayor contenido de proteína cruda y fibra dietética. Las diferencias observadas en la composición química, el perfil de ácidos grasos y la actividad antioxidante se deben a las variedades, considerando que todas las demás condiciones de cultivo eran las mismas. Los resultados obtenidos sugieren que la semilla de cáñamo puede ser utilizada como fuente de lípidos y proteínas en las dietas animales debido a su valiosa actividad antioxidante y como una rica fuente de ácidos grasos esenciales.