Introducción: Nuestros estudios anteriores mostraron niveles elevados de Semaforina3a (Sema3A) en la orina de pacientes con cáncer urotelial en comparación con pacientes sanos. El objetivo de este estudio fue analizar la extensión de la expresión de Sema3A en tejido urotelial normal y maligno utilizando análisis microscópico de inmunotinción y morfometría. Materiales y Métodos: Se recuperaron y analizaron cincuenta y siete muestras de vejiga embebidas en parafina de nuestro archivo de patología: 14 muestras de urotelio normal, 21 muestras que contenían carcinoma urotelial de bajo grado, 13 muestras de pacientes con carcinoma urotelial de alto grado, 7 muestras que contenían carcinoma urotelial invasivo en músculo y 2 muestras con carcinoma urotelial in situ puro. Todas las muestras fueron inmunotintadas con anticuerpos anti Sema3A. Se analizó el área de tejido teñido con Sema3A y su intensidad utilizando morfometría computarizada y se compararon entre los grupos de muestras. Resultados: En el tejido vesical normal, se demostró una tinción muy ligera de Sema3A en la capa basal de la mucosa y desapareció completamente en la capa apical. En las muestras de tumores de bajo grado, las células en la capa basal de la mucosa también estaban ligeramente teñidas con Sema3A, pero la expresión de Sema3A se intensificó al moverse apicalmente, alcanzando su nivel más alto en las células apicales que se exfoliaban hacia la orina. En los tumores uroteliales de alto grado, la tinción de Sema3A fue intensa en todo el grosor de la mucosa. En las muestras que contenían carcinoma in situ, la intensidad de la tinción fue alta y homogénea en todas las células neoplásicas. Conclusiones: Sema3A podría servir como un marcador no invasivo potencial del cáncer urotelial.