Las bacterias lácticas (LAB) no solo deben sobrevivir, sino también desempeñarse bajo una presión osmótica aumentada en el proceso de ensilaje, que resulta de la mejor práctica de marchitamiento del forraje. Se necesitan protocolos de laboratorio simples para seleccionar cepas de LAB adecuadas como inoculantes para condiciones de alto contenido de materia seca (MS). El objetivo de este estudio fue simular condiciones de alta osmolalidad sin inducir estrés salino y seleccionar un indicador adecuado del rendimiento de LAB. Para ello, se enriqueció un medio MRS con concentraciones crecientes de glucosa y fructosa más un máximo de 28 g de KCl/L hasta alcanzar una osmolalidad de 2.4 osmol/kg. Tanto el crecimiento en el medio inoculado como la disminución del pH se compararon luego con el rendimiento de LAB en el medio básico. Este último se retrasó claramente en el nuevo medio. Finalmente, el método se validó comparando el pH de ensilajes de hierba a pequeña escala de 30-35 y 45-49% de MS objetivo después de 3-5 días de ensilado con los valores de pH del medio de crecimiento microbiológico. Los niveles de pH de los tratamientos con LAB homofermentativos fueron claramente atribuibles al contenido de materia seca o a la concentración de azúcar, respectivamente. El medio de crecimiento líquido desarrollado aproxima suficientemente las condiciones de alta MS para seleccionar las LAB homofermentativas osmotolerantes.