El sapelovirus porcino (PSV), el kobuvirus porcino (PKV), el teschovirus porcino (PTV) y el enterovirus porcino G (EV-G) son virus importantes en la industria porcina. Estos virus desempeñan roles importantes en el establecimiento de signos clínicos similares de diarrea, encefalitis y trastornos reproductivos y respiratorios en los rebaños de cerdos. La detección diferencial de estos virus es crucial para el diagnóstico preciso de estas enfermedades. En este estudio, se desarrolló un RT-PCR cuantitativo en tiempo real cuádruple (RT-qPCR) para la detección simultánea de PSV, PKV, PTV y EV-G. El ensayo mostró alta sensibilidad, fuerte especificidad y excelente repetibilidad. El ensayo se evaluó además por su aplicabilidad mediante la prueba de 1823 muestras fecales recolectadas de diferentes granjas porcinas. Las tasas de positividad de PSV, PKV, PTV y EV-G fueron del 15.25% (278/1823), 21.72% (396/1823), 18.82% (343/1823) y 27.10% (494/1823), respectivamente, con tasas de coincidencia superiores al 99.01% para el RT-qPCR/RT-PCR de referencia. Los resultados indicaron que el ensayo desarrollado proporciona un método rápido, sensible y preciso para la detección simultánea de PSV, PKV, PTV y EV-G.