El confinamiento de peces transgénicos es esencial para prevenir su escape y reproducción en ecosistemas naturales. La esterilización transgénica reversible es un enfoque prometedor para controlar la reproducción de peces transgénicos. Por lo tanto, el presente estudio se llevó a cabo para desarrollar un pez gato canal (Ictalurus punctatus) reversiblemente estéril a través de la sobreexpresión transgénica del gen de la descarboxilasa del ácido glutámico (GAD) del pez dorado (Carassius auratus) impulsado por el promotor de la beta-actina de la carpa común (Cyprinus carpio) para interrumpir la regulación normal del ácido gamma-aminobutírico (GABA). Se produjeron tres generaciones de peces transgénicos GAD. Todas las generaciones estudiadas mostraron un rendimiento reproductivo reprimido; sin embargo, esto no siempre fue estadísticamente significativo. En la generación F, el 5.4% de los peces transgénicos mostraron una puntuación de madurez sexual >= 4 (máximo = 5) a los cinco años de edad, lo que fue inferior (p = 0.07) al del grupo de control (16.8%). En los experimentos de desove realizados en peces transgénicos de la generación F a los seis y nueve años de edad, el 45.5% y el 20.0% de los peces desovaron de forma natural, representando valores más bajos (p = 0.09 y 0.12, respectivamente) que los porcentajes en los peces de control hermanos de la misma edad (83.3% y 66.7%, respectivamente). Cuatro de seis pares de los peces supuestamente infértiles de seis años desovaron con éxito después de la terapia con análogo de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRHa). Resultados similares se observaron en los peces de tres años de la generación F, con un porcentaje de desove más bajo en los peces transgénicos (20.0%) que en el control (66.7%). En los peces transgénicos de la generación F de un año, los niveles medios observados de hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) en suero fueron de 9.23 +/- 2.49 y 8.14 +/- 2.21 ng/mL para las hembras y machos, respectivamente. En los peces de control, los niveles medios de GnRH fueron de 11.04 +/- 4.06 y 9.03 +/- 2.36 ng/mL para las hembras y machos, respectivamente, que no diferían significativamente del control (p = 0.15 y 0.27 para hembras y machos, respectivamente). No hubo diferencia significativa en los niveles de estradiol de los peces transgénicos y no transgénicos en los peces de la generación F de uno y cuatro años. Los peces machos transgénicos de la generación F de cuatro años exhibieron niveles significativamente (p < 0.05) más bajos de GnRH y testosterona que los peces de control. En conclusión, aunque la sobreexpresión de GAD reprimió las habilidades reproductivas del pez gato canal, no esterilizó completamente a los peces transgénicos. La tasa de esterilización podría mejorarse a través de la selección en generaciones futuras.