Las diapositivas de patología teñidas con Hematoxilina y Eosina (H&E) archivadas se almacenan rutinariamente para indexar bloques de tejido de muestra fijados en formalina e incrustados en parafina (FFPE). Los bloques de FFPE son especímenes de tumores humanos clínicamente anotados que pueden ser valiosos en estudios décadas después de que se recolecta el tejido. Si se almacenan adecuadamente, tienen el potencial de producir un número valioso de diapositivas seccionadas en serie para fines diagnósticos o de investigación. Sin embargo, algunos estudios retrospectivos están limitados en alcance porque las muestras de tejido se han agotado o no hay suficiente material disponible en los bloques almacenados para secciones en serie. El objetivo de estos estudios fue determinar si las diapositivas teñidas con H&E archivadas pueden ser reutilizadas directamente mediante la optimización de métodos para desmanchar y luego volver a teñir las diapositivas teñidas con H&E para permitir la detección de varios biomarcadores de interés utilizando un anticuerpo conjugado con procedimiento de inmunohistoquímica multiplex de cromógeno. Este procedimiento simple pero innovador, combinado con técnicas de análisis de imágenes, demuestra la capacidad de realizar una detección precisa de marcadores relevantes correlacionados con la progresión de la enfermedad en regiones tumorales inicialmente identificadas en el tejido. Esto puede agregar valor clínico al retener las diapositivas de H&E para un uso posterior.