La rúcula es una verdura de hoja con sabor picante relacionado con la presencia de isotiocianatos (ITCs). A pesar del interés en ella como un cultivo de alta calidad organoléptica, la variabilidad del perfil volátil en la especie sigue siendo desconocida. Veinticuatro poblaciones cultivadas en invernadero fueron evaluadas. Se encontró una considerable diversidad en los niveles totales de volátiles, proporcionando información sobre la intensidad del aroma entre los accesos. Los ITCs representaron la fracción principal. El ITC de alilo fue el compuesto principal, y los niveles mostraron hasta una diferencia de 6 veces entre las poblaciones. La fracción de ésteres estuvo principalmente representada por -3-hexenil isovalerato y -3-hexenil butirato, con diferencias de hasta 20 veces entre las poblaciones. Además, se evaluó el contenido de sinigrina como la principal GSL en la rúcula. Las diferencias alcanzaron hasta 13 veces. Estos resultados sugieren que algunas poblaciones pueden ser utilizadas para desarrollar variedades muy picantes, mientras que otras pueden ser seleccionadas para variedades suavemente picantes, como es el caso de DER045 con bajos niveles de ITCs y altos en ésteres. La presencia de varios ITCs en el perfil también sugirió la presencia de otras nuevas GSLs. En general, el trabajo aumenta el conocimiento sobre la variabilidad de la rúcula para el perfil volátil y la acumulación de sinigrina, un punto de partida para futuros programas de cría.