Los defectos del cartílago articular comúnmente resultan de traumas y están asociados con una morbimortalidad significativa. Dado que el cartílago es un tejido avascular, aneural y a-linfático con una capacidad de curación intrínseca pobre, la regeneración de un cartílago hialino funcional sigue siendo un problema clínico difícil. Las células madre mesenquimales (MSC) son células multipotentes con potencial de diferenciación multilineal, incluida la capacidad de diferenciarse en condrocitos. Debido a su disponibilidad y facilidad de expansión ex vivo, los médicos están aplicando cada vez más MSC en el tratamiento de lesiones de cartílago. Sin embargo, a pesar de los alentadores datos preclínicos y clínicos, las inconsistencias en el potencial proliferativo y condrogénico de las MSC dependiendo del donante, la fuente de tejido, el subconjunto celular, las condiciones de cultivo y las técnicas de manipulación siguen siendo una barrera clave para la aplicación clínica generalizada de la terapia con MSC en la regeneración del cartílago. En esta revisión, destacamos las estrategias para gestionar la heterogeneidad de las MSC ex vivo para una reparación de cartílago más efectiva, incluyendo la reducción del período de expansión del cultivo de MSC y la selección de MSC con un mayor potencial condrogénico a través de marcadores genéticos específicos, marcadores de superficie y atributos biofísicos. El logro de una población menos heterogénea de MSC expandidas en cultivo puede mejorar la escalabilidad, la reproducibilidad y la estandarización de la terapia con MSC para su aplicación clínica en la regeneración del cartílago.