Los parientes silvestres de cultivos (CWRs) pertenecientes a la familia Brassicaceae poseen una extensa diversidad genética y han sido frecuentemente utilizados en la mejora de especies cultivadas. Sin embargo, su tolerancia al glifosato, un herbicida ampliamente utilizado, ha permanecido desconocida. Nuestro estudio examinó la respuesta al glifosato de 20 genotipos de la familia Brassicaceae, que incluían genotipos dentro del triángulo U y sus parientes silvestres. Evaluamos su comportamiento basado en respuestas morfo-bioquímicas, centrándonos específicamente en los rasgos de porcentaje de germinación, longitud de raíz y porcentaje de supervivencia. Al calcular el valor de la función de membresía media (MFV) para la respuesta de cada genotipo a estos rasgos, los clasificamos en tres grupos distintos: susceptibles, moderadamente tolerantes y tolerantes. Entre estos genotipos, (NRCPB rapa 8) demostró tolerancia al glifosato, como lo indicaba su valor de MFV medio de 0,68. Se observó una tolerancia moderada al glifosato en (Pusa Jaikisan) con un valor de MFV medio de 0,52. Por otro lado, , , y fueron susceptibles, con valores de MFV medios de 0,37, 0,35 y 0,34, respectivamente. Estos hallazgos revelaron diferentes niveles de respuesta al glifosato entre estos genotipos, con algunos mostrando una tolerancia significativa. El estudio proporciona información valiosa sobre la tolerancia al herbicida de los CWRs de Brassica y destaca el uso potencial de marcadores fenotípicos y bioquímicos en la evaluación de la tolerancia a herbicidas.