El síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2), el virus responsable de COVID-19, se ha encontrado que infecta a varias especies de animales domésticos y salvajes. En este estudio, se analizaron muestras de suero de conveniencia de 575 bisontes, 180 alces y 147 muestras de varias especies de vida silvestre recolectadas entre 2020 y 2023 de varias regiones de los Estados Unidos para detectar la presencia de anticuerpos específicos contra SARS-CoV-2. Se utilizaron dos ensayos ELISA comerciales basados en la inhibición del dominio de unión al receptor de SARS-CoV-2 (sVNT) o la proteína nucleocápside (N-ELISA) de SARS-CoV-2. Las muestras positivas del sVNT se evaluaron adicionalmente utilizando una prueba convencional de neutralización viral (VNT). Nuestros resultados indicaron que el 1.2% de los bisontes, el 2.2% de los alces y el 4.1% de las muestras de suero de otras especies de vida silvestre fueron seropositivas en el sVNT, mientras que el 4.2% de los bisontes, el 3.3% de los alces y el 1.4% de las muestras de suero de otras especies de vida silvestre en cautiverio dieron positivo en el N-ELISA. Entre las muestras de suero del sVNT, dos muestras de bisontes, una muestra de alce y cinco muestras de suero de otras especies de vida silvestre (un guepardo, un gorila, dos leones y un hipopótamo) tenían títulos de anticuerpos neutralizantes en el VNT, lo que indica que estas especies son susceptibles a la infección por SARS-CoV-2. Estos hallazgos destacan la importancia de los amplios esfuerzos de vigilancia para el monitoreo efectivo de SARS-CoV-2 en hospedadores no humanos.