La antracnosis es una enfermedad fúngica devastadora en los viveros de fresas. Diversas especies son responsables de la antracnosis de las fresas. En este estudio, se obtuvieron 105 aislados de plántulas de fresas con síntomas de antracnosis en quince viveros ubicados en la provincia de Zhejiang, China, y se clasificaron en base a análisis de secuencias multilocus y características morfológicas. El análisis de ITS, , , , y reveló que se detectaron cuatro especies dentro del complejo de especies, incluyendo (56 aislados, 53.3%), (37 aislados, 35.2%), (7 aislados, 6.7%), y (5 aislados, 4.8%), en plántulas enfermas. El tiofanato-metilo es uno de los fungicidas de benzimidazol y ha sido utilizado desde hace mucho tiempo para controlar la antracnosis de las fresas en China. Aquí, se determinó la resistencia al tiofanato-metilo de los aislados mediante el método de concentración inhibitoria mínima (CIM). Nuestros resultados indicaron que la frecuencia de resistencia fue de hasta el 96.2%, que contenía un 94.3% de aislados altamente resistentes. Solo se detectaron cuatro aislados sensibles (dos , un , y un aislado) y dos aislados moderadamente resistentes (un aislado y un aislado). Nuestros datos indicaron que la alta resistencia fue causada principalmente por la mutación E198A en la proteína. Además, se detectaron F200Y (TTCTAC) en la proteína en dos aislados moderadamente resistentes. Basándonos en la mutación puntual en el codón 198 (GAGGCG) en el gen de los aislados, desarrollamos un ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) para detectar rápidamente los mutantes E198A. En conjunto, nuestro estudio indicó que cuatro especies dentro del complejo de especies estaban asociadas con síntomas de antracnosis en los viveros de fresas en la provincia de Zhejiang, y la resistencia grave estaba ampliamente extendida en cada especie.