Las cotiledones epigeas con ejes embrionarios excisados son a menudo utilizadas como un sistema modelo para estudiar los procesos de división y expansión celular. Estos procesos están regulados por diversas fitohormonas y moléculas señalizadoras. Las fitohormonas modulan los sistemas de defensa antioxidante e interactúan con especies reactivas de oxígeno (ROS) para sincronizar el crecimiento celular normal de las plantas. Este estudio proporciona nueva información sobre las alteraciones en las enzimas antioxidantes vinculadas a la producción y eliminación de ROS en cotiledones epigeos excisados de calabacín cultivados en soluciones de metil jasmonato (MeJA) y citoquininas (CKs) - N-bencil adenina y N-(2-cloropiridin-4-il)-N-fenilurea - en presencia o ausencia de luz en condiciones de laboratorio. El material de los cotiledones se utilizó para determinar la dinámica de los parámetros bioquímicos seleccionados desde el 2º hasta el 6º día de incubación. En general, nuestros resultados revelaron que el MeJA exógeno causó una reducción en el contenido de peróxido de hidrógeno (HO) y prolina libre, así como en la actividad de la superóxido dismutasa (SOD), peroxidasa de guaiacol (POX) y catalasa (CAT) en los cotiledones cultivados en la oscuridad. Aplicados solos, ambas citoquininas aumentaron la mayoría de los parámetros estudiados, excepto los niveles de prolina y proteínas. Sin embargo, cuando el MeJA se combinó con las CKs, actuó de manera diversa, desde antagonista hasta sinérgica dependiendo del tipo de citoquinina, parámetro medido y régimen de luz. Alteraciones similares también se encontraron en los niveles de pigmentos foliares en los cotiledones cultivados bajo condiciones de luz. En general, los cambios en las actividades de las enzimas antioxidantes debido a la luz fueron más intensos que los observados en los cotiledones cultivados en la oscuridad. Los datos obtenidos muestran, por primera vez, la implicación de la interacción hormonal entre MeJA y CKs en los cambios bioquímicos en la defensa antioxidante durante el crecimiento de los cotiledones bajo diferentes condiciones de luz.