(Burm.f.) Wall. (Acanthaceae) es venerada por sus propiedades medicinales. El cultivo in vitro de plantas medicinales ha ayudado a mejorar tanto la cantidad como la calidad de su producción. El estudio actual investigó los efectos de diferentes tratamientos de esterilización superficial, reguladores del crecimiento de plantas (PGRs) y elicitores en el establecimiento del cultivo y la multiplicación de brotes axilares de . Posteriormente, se evaluó la producción de andrographolide en los plantones in vitro utilizando análisis de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). El explante de punta de brote se esterilizó con éxito utilizando 60% de blanqueador comercial durante 5 minutos de inmersión, con una tasa de supervivencia del 90% y un cultivo aséptico del 96.67%. El PGR óptimo para el crecimiento de brotes fue 6-benzilaminopurina (BAP) a 17.76 uM, suplementado en medio de Murashige y Skoog (MS), produciendo 23.57 +/- 0.48 hojas, 7.33 +/- 0.10 brotes y una longitud de brotes de 3.06 +/- 0.02 cm. Posteriormente, el medio MS suplementado con 5 mg/L de quitosano produjo 26.07 +/- 0.14 hojas, 8.33 +/- 0.07 brotes y una longitud de brotes de 3.63 +/- 0.02 cm. El contenido más alto de andrographolide se obtuvo utilizando los plantones cosechados de 5 mg/L de quitosano con 2463.03 +/- 0.398 ug/mL en comparación con el control (sin elicitar) con 256.73 +/- 0.341 ug/mL (859.39% de aumento). Los resultados implican que se desarrolló el protocolo para el cultivo de punta de brote de , y que la elicitation mejoró el rendimiento de la hierba y la producción de andrographolide.