La adaptación funcional y los mecanismos moleculares subyacentes de las hemoglobinas (Hbs) se han concentrado principalmente en mamíferos y aves, con pocos informes sobre reptiles. Este estudio tuvo como objetivo investigar los mecanismos de adaptación convergente y específicos de especie de alta altitud de las Hbs en dos lagartos del Plateau Qinghai-Tíbet. Las Hbs de alta altitud se caracterizaron por una afinidad general y intrínseca de Hb-O significativamente alta en comparación con sus poblaciones de baja altitud. A pesar de las sensibilidades similares y bajas al Cl, las Hbs de alta altitud mostraron una mayor sensibilidad al ATP y efectos Bohr dependientes del ATP que las de baja altitud, lo que podría facilitar la liberación de O en los tejidos respiratorios. Las Hbs de los lagartos mostraron sensibilidades térmicas igualmente bajas y efectos Bohr relativamente altos a temperaturas más bajas, lo que podría ayudar a entregar y liberar O de manera estable a las extremidades frías a bajas temperaturas. Las propiedades de oxigenación de las Hbs en poblaciones de alta altitud podrían atribuirse a diferentes proporciones de globina beta2/beta1 y sustituciones en la globina tipo beta2. Notablemente, la Asn12Ala en la zona baja podría causar una desestabilización localizada de la hélice E en la Hb tetramérica al eliminar enlaces de hidrógeno, lo que resulta en su menor afinidad por el O. Este estudio proporciona una referencia valiosa para los mecanismos de adaptación a alta altitud de las hemoglobinas en reptiles.