El azafrán (L.), siendo uno de los cultivos de especias comerciales más destacados del mundo, está en demanda por sus beneficios culinarios, colorantes y farmacéuticos. En este estudio, se estableció un novedoso sistema de embriogénesis somática indirecta (ESI) para el estudio de esta planta. Para ello, en primer lugar, se cultivaron los brotes laterales. Luego, las culturas se transformaron utilizando medio Murashige y Skoog (MS) suplementado con 6-benziladenina (BA: 5 y 10 mg/L), ácido naftalenoacético (NAA: 0, 1 y 2 mg/L) o trans-zeatina (tZ: 0, 0.5 y 1.0 mg/L), antes de ser clasificadas en cuatro estructuras: globulares blancas (GB), nodulares compactas amarillas (NCA), frágiles amarillas-marrones (FAM) y porosas marrones oscuras (PMD). Tan pronto como se añadieron BA (10 mg/L) y NAA (2 mg/L), se indujeron porcentajes elevados de callos globulares blancos (56.8%) y estructuras de callos globulares blancos (31.5%). Además, 6-benziladenina (5 mg/L) y ácido naftalenoacético (1 mg/L) permitieron la formación de estructuras frágiles amarillas-marrones, y la combinación de 6-benziladenina (10 mg/L) con trans-zeatina (1 mg/L) formó las estructuras PMD. Después de tres meses, los callos globulares blancos se incubaron utilizando el medio basal MS, antes de ser aumentados con tidiazuron (TDZ: 1 mg/L) y picloram (PIC: 2 mg/L), de los cuales el 60% de los casos maduraron en brotes y, en última instancia, en cormos. Los análisis morfoanatómicos también mostraron que las células de los callos globulares blancos estaban dispuestas de manera cercana, ya que tenían un citoplasma denso, una diferenciación vascular significativa y embriodes. Además, las estructuras nodulares compactas amarillas se caracterizaron por una fuerte capacidad de diferenciación y contenían muchas células meristemáticas con altos centros de cariomitosis. Observamos que los callos frágiles amarillos-marrones tenían disposiciones celulares más sueltas, con una estructura vascular ubicada en el borde del protodermo, mientras que no había una disposición celular obvia en las estructuras porosas marrones oscuras. La inducción de los brotes adventicios in vivo en el medio MS que fue suplementado con tidiazuron y picloram demostró, en consecuencia, las tasas más altas (60%) de callos globulares blancos.