Un enfoque refinado para aislar interneuronas para estudios epigenéticos de alta validez en tejido cerebral humano
Autores: Cariaga-Martínez, Ariel; Gutierrez, Kilian Jesús; Regidor, Ignacio; Del Álamo, Marta; Saiz-Ruiz, Jerónimo; Alelú-Paz, Raúl
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Un enfoque refinado para aislar interneuronas para estudios epigenéticos de alta validez en tejido cerebral humano
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Investigación epigenética
Cerebro humano
Poblaciones neuronales
Interneuronas
Trastornos psiquiátricos
Extracción de ADN
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 26
Citaciones: Sin citaciones
La investigación epigenética ha avanzado notablemente en los últimos años, sin embargo, nuestra capacidad para explorar el cerebro humano a nivel celular sigue siendo limitada. Uno de los principales obstáculos ha sido la dificultad de aislar poblaciones neuronales específicas de tejido post mortem, en particular interneuronas, que desempeñan un papel central en muchos trastornos psiquiátricos. En este estudio, presentamos un protocolo práctico y reproducible para aislar interneuronas GAD-positivas a partir de muestras de cerebro humano. Aislamos estructuras celulares permeabilizadas adecuadas para análisis epigenético posterior. Para garantizar la especificidad, validamos las células aisladas comparándolas con interneuronas derivadas de iPSC humanas. Este enfoque permite la extracción de ADN de alta calidad adecuado para análisis epigenético posterior, incluida la PCR específica de metilación. Al dirigirse a un subtipo neuronal bien definido, nuestro método proporciona una base sólida para estudiar los cambios moleculares asociados con trastornos como la esquizofrenia y el autismo. Este protocolo abre nuevas puertas para investigaciones específicas de células en tejido cerebral, un paso adelante en la comprensión de cómo los mecanismos epigenéticos contribuyen a la fisiopatología neuropsiquiátrica.
Descripción
La investigación epigenética ha avanzado notablemente en los últimos años, sin embargo, nuestra capacidad para explorar el cerebro humano a nivel celular sigue siendo limitada. Uno de los principales obstáculos ha sido la dificultad de aislar poblaciones neuronales específicas de tejido post mortem, en particular interneuronas, que desempeñan un papel central en muchos trastornos psiquiátricos. En este estudio, presentamos un protocolo práctico y reproducible para aislar interneuronas GAD-positivas a partir de muestras de cerebro humano. Aislamos estructuras celulares permeabilizadas adecuadas para análisis epigenético posterior. Para garantizar la especificidad, validamos las células aisladas comparándolas con interneuronas derivadas de iPSC humanas. Este enfoque permite la extracción de ADN de alta calidad adecuado para análisis epigenético posterior, incluida la PCR específica de metilación. Al dirigirse a un subtipo neuronal bien definido, nuestro método proporciona una base sólida para estudiar los cambios moleculares asociados con trastornos como la esquizofrenia y el autismo. Este protocolo abre nuevas puertas para investigaciones específicas de células en tejido cerebral, un paso adelante en la comprensión de cómo los mecanismos epigenéticos contribuyen a la fisiopatología neuropsiquiátrica.