La reproducción está clásicamente controlada por la hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH-I) y su receptor (GnRHR-I) dentro del cerebro. En cerdos, también se produce una segunda forma (GnRH-II) y su receptor específico (GnRHR-II), con mayor abundancia en tejidos reproductivos periféricos en comparación con los centrales. La unión de GnRH-II a GnRHR-II se ha implicado en la regulación autocrina/paracrina de la esteroidogénesis gonadal en lugar de la secreción de gonadotropinas. Se recolectaron muestras de sangre de cerdas transgénicas, con la reducción ubicua de GnRHR-II (GnRHR-II KD; n = 8) y controles de camada (n = 7) al inicio del estro (folicular) y 10 días después (luteal); se cuantificaron las concentraciones séricas de 16 hormonas esteroides mediante cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS). Tras la eutanasia, se registraron el peso ovárico (OWT), la tasa de ovulación (OR) y el peso de cada cuerpo lúteo extirpado (CLWT); se realizó HPLC-MS/MS en homogenatos de CL. Durante la fase luteal, la concentración sérica de progesterona se redujo en un 18% en cerdas GnRHR-II KD en comparación con las cerdas de control (p = 0.0329). La edad y el peso en la pubertad, la duración del ciclo estral y el OWT fueron similares entre las líneas (p > 0.05). Curiosamente, la OR se redujo (p = 0.0123), y el CLWT total tendió a ser reducido (p = 0.0958) en GnRHR-II KD en comparación con las hembras de control. Las células luteínicas en secciones de CL de cerdas GnRHR-II KD eran hipotróficas (p < 0.0001). Por lo tanto, GnRH-II y su receptor pueden ayudar a regular la OR, el desarrollo del CL y la producción de progesterona en cerdas.