Se informa que el ejercicio intenso induce fatiga física y cognitiva, pero pocos estudios se han centrado en tratamientos para aliviar la fatiga. Hipotetizamos que la suplementación oral de hidrolizado de placenta porcina enzimática (EPPH) preparado con enzimas proteasas podría aliviar la fatiga inducida por el ejercicio en un modelo animal. Los objetivos del estudio fueron examinar la hipótesis y el mecanismo de acción del EPPH en el alivio de la fatiga física y cognitiva. Cincuenta ratas macho Sprague-Dawley de 8 semanas (peso corporal: 201 g) fueron clasificadas en cinco grupos, y a las ratas de cada grupo se les administró agua destilada oral, EPPH (5 mg de nitrógeno/mL) en dosis de 0.08, 0.16 o 0.31 mL/kg de peso corporal (PC)/día, o glutatión (100 mg/kg PC/día) mediante una aguja de alimentación durante 5 semanas, que se denominaron como los grupos control, L-EPPH, M-EPPH, H-EPPH o grupos de control positivo, respectivamente. Diez ratas adicionales no realizaron ejercicio intenso con administración de agua y fueron designadas como el grupo sin ejercicio. Después de 2 semanas, las ratas fueron sometidas a ejercicio intenso y a una prueba de natación forzada durante 30 minutos una vez por semana durante 4 semanas adicionales. A los 5 minutos después del ejercicio intenso, las concentraciones de lactato y la actividad de lactato deshidrogenasa (LDH) en el suero y el músculo gastrocnemio fueron más altas en el grupo control, mientras que los tratamientos M-EPPH y H-EPPH suprimieron el aumento mejor que en el grupo de control positivo (< 0.05). El ejercicio intenso disminuyó el contenido de glucógeno en el hígado y el músculo gastrocnemio, y M-EPPH y H-EPPH inhibieron la disminución (< 0.05). Además, los contenidos de peróxido lipídico en el músculo gastrocnemio y el hígado fueron más altos en el grupo control que en los grupos M-EPPH, H-EPPH, control positivo y sin ejercicio (< 0.05). Sin embargo, las actividades de las enzimas antioxidantes como la superóxido dismutasa (SOD) y la glutatión peroxidasa (GSH-Px) fueron opuestas a los contenidos de peróxido lipídico. Las expresiones de corticosterona hipotalámica y de ARNm del factor de necrosis tumoral (TNF)-alfa e IL-1beta en el hipocampo fueron más altas. Sin embargo, la expresión de ARNm del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) en el hipocampo y los contenidos de proteína fueron más bajos en el grupo control que en el grupo de control positivo. M-EPPH, H-EPPH y el control positivo suprimieron los cambios activando la fosforilación de la proteína de unión al elemento de respuesta cAMP en el hipocampo, y H-EPPH mostró mejor actividad que en el control positivo (< 0.05). En conclusión, la ingesta de EPPH (0.16-0.31 mL/kg PC) redujo la fatiga física y cognitiva inducida por el ejercicio en ratas y podría desarrollarse potencialmente como un agente terapéutico para aliviar la fatiga en humanos.